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穿梭箱實驗在小鼠主動回避學習中的作用

時間:2021-09-22 點擊:1318次

目前,對于該腦區(qū)在主動回避學習中的調節(jié)機制尚未*明確。目的:探索中腦導水管周圍灰質氨基丁酸(y-Aminobutyricacid,GABA)能神經(jīng)元在主動回避學習中的調控作用。方法:通過穿梭箱實驗,對實驗小鼠進行主動回避訓練;通過早期即刻基因c-fos免yi熒光染色確定小鼠PAG內c-fos表達的變化;利用腦立體定位注射,將攜帶有hM3Dq或hM4Di基因的重組腺相關病毒定位注射于Vgat-cre轉基因小鼠的PAG內,待2-3周后GABA能神經(jīng)元穩(wěn)定表達hM3Dq或hM4Di。制備300|im厚度的PAG離體腦片,進行全細胞膜片鉗記錄,記錄CNO對GABA能神經(jīng)元活動的調節(jié)。應用化學遺傳學技術,在清醒小鼠體內特異性激活或者抑制PAG的GABA能神經(jīng)元,觀察改變GABA能神經(jīng)元的活動對小鼠主動回避學習能力的影響;結果:Vgat-ChR2-EYFP轉基因小鼠在主動回避學習中存在延遲建立的特性;主動回避學習中,與正常小鼠相比,建立遲緩的小鼠PAG內GABA能神經(jīng)元激活的數(shù)量增多;PAG內表達hM3Dq的GABA能神經(jīng)元被其配體**氯氮平-N-氧化物(Clozapine-N-oxide,CNO)特異性激活,動作電位發(fā)放頻率增加,表達hM4Di的GABA能神經(jīng)元被CNO特異性抑制,神經(jīng)元動作電位的發(fā)放頻率降低;在主動回避學習過程中,使用CNO特異性激活PAG的GABA能神經(jīng)元可以延緩主動回避學習過程,使用CNO特異性抑制PAG的GABA  
能神經(jīng)元并不影響主動回避行為的建立。結論:Vgat-ChR2-EYFP轉基因小鼠存在主動回避學習障礙,PAG的GABA能神經(jīng)元調節(jié)主動回避行為的建立,激活PAG的GABA能神經(jīng)元可以起到延緩主動回避行為建立的作用。

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